黄 色 成 年人在线-黄 色 大 片 网站-黄 色 毛片免费-黄aaa-黄a大片-黄a大片av永久免费

您好!歡迎訪問上海喆圖科學儀器有限公司網站!
全國服務咨詢熱線:

400-001-0304

當前位置:首頁 > 技術文章 > 牛血清在細胞培養中的作用與質量要求

牛血清在細胞培養中的作用與質量要求

更新時間:2021-06-22  |  點擊率:983

       檢查方法:


已證明無外源因子污染的牛細胞培養物,在細胞生長液中加15%待測血清,連傳3代共21天。陰性對照細胞培養液
中加15%已知無病毒污染的牛血清,與試驗組同條件下進行。在觀察期內注意細胞形態變化或細胞病變。在觀察
期內第14天待檢樣品和對照樣品用標準病毒檢測方法檢查。
如待檢細胞培養物經胰酶消化后分種到6個含蓋玻片的容器內。陰性對照樣品按同樣方法。再將牛腹泄病毒、牛細
小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼腸弧病毒分別加入待檢培養物蓋玻片容器內作為陽性對照,再培養7天,用熒光
抗體技術進行檢查。
細胞病變或病毒引起的其他改變通過蘇木精或伊紅染色進行觀察。取另外一個待檢細胞培養瓶用人“O”紅細胞、
豚鼠紅細胞和新鮮雞紅細胞作血球吸附病毒檢查。試驗在2~8℃和20~24℃進行。陰性對照細胞預先感染副流感
Ⅲ型病毒作為陽性對照。未感染的細胞作為陰性對照。
3)內毒素檢測
用鱟試劑檢查。
4)細菌噬菌體檢查
主要檢查E.Coli(C300 or K-12)噬菌體。
5)激素含量測定
每批FBS對某些激素含量都要進行測定,包括:雌二醇、胰島素、孕硐、睪丸素、甲狀腺素等。
6)血紅蛋白檢測
血紅蛋白與氧合血紅蛋白的比≥70%,血紅蛋白含量≤mg15/dl。
7)細胞生長效果測定
a.細胞克隆效果測定
細胞選擇:Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653
血清濃度與細胞數:
10%血清/1個細胞/孔
4%血清/5個細胞/孔
細胞培養基RPMI-1640, 96孔培養盤36℃±2℃,5%二氧化碳培養10~
15天。試驗中選擇一個已知參考牛血清作對照。
克隆效率計算:
克隆效率=(陽性孔平均數/ 培養孔總數) X100% 
相對克隆效率=待測血清克隆效率/參考血清克隆效率
b.貼壁效率試驗:
用人的傳代細胞作每批血清的貼壁效率試驗,A549(人肺癌細胞)該細胞可以反應出低濃度血清的貼壁變化。采
用6孔培養盤每批血清用兩種濃度和兩種不同的細胞接種數即10%血清――100細胞/孔,4%血清200介細胞/孔
。放36℃±2℃,濕潤5%二氧化碳培養箱培養10~14天,計算著色細胞克隆,確定貼壁效率。從這兩種不同血清
濃度來確立實驗血清支持細胞貼壁生長的水平,分析兩種試驗條件下平均貼壁效率。
貼壁效率(%)=(每孔克隆平均數/ 每孔活存的培養細胞平均數) X100%
相對貼壁效率=被測血清貼壁效率/參考血清貼壁效率
c. 二倍體纖維細胞促生長試驗
人二倍體細胞株 WI28 MRc5
25cm2細胞培養瓶,5%血清,每瓶接種1.5X105細胞連傳3代,每代血清濃度和接種細胞數相同,每代培養7天,每
代接種二個細胞瓶,36℃±2℃培養。以同樣條件用已知參考血清進行平行培養。每代收獲細胞計數,計算每批待
檢血清與參考血清的相對生長率(RGR)。
RGR=(試驗血清每瓶細胞平均數/ 參考血清每瓶細胞平均數) X100%

掃一掃,添加微信
地址:上海張江醫療器械產業基地(瑞慶路528號) 傳真:
©2025 上海喆圖科學儀器有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備14016230號-3
主站蜘蛛池模板: 成人欧美在线观看免费视频| 福利资源站| 久久免费视频在线| 日本不卡在线播放| 婷婷在线五月| 一级毛片视频| 99爱在线精品视频免费观看9| 国产精品久久久久国产精品三级 | 一级特黄特交牲大片| 99视频在线看| 国产国拍亚洲精品午夜不卡17 | 国产在线视频色综合| 久久久久免费观看| 欧美日韩一区二区三区毛片| 涩涩虎| 亚洲黄色在线观看视频| 中文字幕 亚洲一区| 成年美女| 国产精品女仆装在线播放| 九九国产精品九九| 久久一区二区三区免费| 欧美视频一二三区| 日本一区精品久久久久影院| 甜心女孩泰剧在线观看| 亚洲天堂一区二区三区| 2018天天操天天干| 爱操在线视频| 国产成人亚洲精品77| 国产亚洲视频在线| 久久91精品久久91综合| 美女色片| 欧美人与动性xxxxbbbb| 日本一级特黄毛片高清视频| 四虎国产精品影库永久免费| 亚洲91| 亚洲视频 在线观看| 在线精品国产| 91亚洲精品视频| 爱爱网站免费| 福利午夜国产网站在线不卡| 国产亚洲精品国看不卡|